一、 检测项目名称：循环肿瘤DNA多基因变异联合检测

二、 最高限价：人民币3.95万/21例

三、 检测要求：

借助二代测序（NGS）技术检测ctDNA基因突变谱改变

1. 对10ml全血标本进行血浆分离，获得约5ml的血浆，采用游离DNA提取试剂盒提取ctDNA，并借助NanoDrop等仪器进行浓度测定；

2. 取50ngDNA，采用通用试剂盒进行文库构建，所得DNA约在170bp左右；

3. 采用通用引物接头序列对片段化的DNA进行PCR扩增，使得DNA的总量达3000ng以上；

4. 通过靶点设计特异性探针对1500ngDNA进行杂交，采用链霉素磁珠进而选择性捕获目标DNA序列。拟采用捕获168个与胰腺癌发生发展的生物学原理及个性化治疗方案高度相关基因的重要外显子及部分内含子区域，配合高达10000x的超高测序深度，从而确保低频变异的检出；

5. 采用通用引物接头序列对目标序列进行富集放大；

6. 将富集好的文库样本根据需要进行混合、变性，用基因高通量测序仪按照仪器标准操作规程上机测序；

7. 将测序获得的序列信息数据传输至肿瘤个体化二代测序数据分析软件运行分析比对，获得判读结果；

四、 参加报价供应商：

本次询价对潜在报价单位进行资格预审，潜在报价单位应满足以下条件：

1. 具有独立法人资格，并提供企业法人的营业执照，经营范围：有生物技术服务（营业执照加盖公章）；

2. 具有独立承担民事责任的能力、具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度、在经营活动中没有违法记录、有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录；即企业纳税完税收证明或员工社保缴税证明等（加盖公章）

3. 参加本次询价前三年，在经营活动中无重大违法、无行贿、受贿案件记录；

（1） 查询信用中国网站（http://www.creditchina.gov.cn）（提供网站查询页面截图并加盖公章）；

（2） 查询中国裁判文书网（http：//wenshu.court.gov.cn）（提供网站查询页面截图并加盖公章）

4. 本次报价活动不接受联合体（两个或两个以上法人或其他组织以一个报价单位的身份）参与，不接受关联公司（在资金、经营、购销等方面，存在直接或间接的拥有或者控制关系）参与

五、 相关资料提交、领取方式及时间安排

1. 资料发送：符合本次询价活动资格要求的报价单位，请于2024年05月20日前将报名资料（询价公告第四条）及报价清单发送至shurong.wei@sphic.org.cn邮箱，

2. 报价单位文件邮件格式：

（1） 报价单位（全称）

（2） 附件：报价文件须加盖公章

六、 廉洁要求：

1. 报价单位须以诚信为原则，保证所提供材料真实有效；

2. 不得提供回扣或者其他商业贿赂，进行非法促销活动；

3. 不得相互串通、排斥报价单位，损害报价单位或其他报价单位的合法权益；

4. 不得有其他违反法律法规的行为；

5. 如确定成交人在本次询价活动中有严重违法行为，本次报价视为无效，并提请有关部门查处并追究其刑事责任

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